创新研发
Innovative R & D
详细信息
【名称】
通用名：牛结节性皮肤病病毒荧光PCR检测试剂盒(探针法)
商品名：无
英文名称：Lumpy skin disease virus Real-time PCR test (Probe)
【用 途】
适用于动物皮肤损伤病灶、皮肤结痂、唾液、眼鼻等分泌物、奶、精液、粪便、媒介生物等样品中牛结节性皮肤病病毒的特异性检测。
【主要成分与含量】
| 序号 | 产品组分 | 规格 |
| 1 | LSDVPCR反应液（含探针） （棕色管） | 1管（1.2mL） |
| 2 | LSDV阳性对照 （红盖管） | 1管（100μL） |
| 3 | LSDV阳性对照 （绿盖管） | 1管（100μL） |
| 4 | 使用说明书 | 1份 |
注意：不同批号的组分不互换使用，试剂盒中组分使用前需充分混匀并离心（建议采用轻弹或颠倒的方式混匀，不建议采用涡旋振荡器混匀），应尽量避免反复冻融！
【荧光PCR仪器适用范围】
ABI7500Fast、ABI7500、Q5等系列，Roche系列，BIO-RAD系列等荧光定量PCR检测仪等。
1样本前处理
①牛病料：剪取50~100mg牛病料组织，加入含500μLPBS或生理盐水的研钵中缓慢研成匀浆，或采取组织冷冻研磨仪进行研磨，将研磨后的匀浆液转移到无RNA酶污染的灭菌离心管中，6000rpm离心30s；取上清液备用。
②唾液、结节溃烂时产生的分泌物、奶和精液：直接取样本6000rpm离心1min；取上清液备用。
2样品DNA提取（样本处理区）
取上述前处理后的样本，按常规方法提取病毒DNA，也可采用商品化试剂盒提取病毒DNA。阴性对照参与提取，以对环境进行监控。阳性对照无需提取，直接使用。
3 PCR体系配制
3.1 取出试剂盒，从中取出实验所需试剂，融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着的液体；
3.2 根据不同PCR仪选择反应管或反应板，反应总体积为25μL，反应液在配液区配制，加样在样品处理区，测试反应体系配制如下表：
| 组分反应管 | 检测管 | 对照管 | |
| 阳性对照 | 阴性对照 | ||
| LSDVPCR反应液（含探针） | 20μL | 20μL | 20μL |
| LSDV阳性对照 | - | 5μL | - |
| LSDV阴性对照 | - | - | 5μL |
| 样品DNA | 5μL | - | - |
| 总体积 | 25μL | 25μL | 25μL |
4 扩增（检测区）
按下列参数设置反应条件：
| 反应参数 | 预变温度 | 45个循环 | |
| 变性 | 退火/延伸 | ||
| 温度 | 95℃ | 95℃ | 58℃ |
| 时间 | 3min | 10sec | 34sec |
荧光信号采集设定在退火/延伸时。对于多通道荧光PCR仪，选择荧光素FAM为信号采集通道，淬灭基因选None，染料校正选None。
5 结果判断
5.1 实验成立条件
5.1.1 阴性对照：无特异性扩增曲线或Ct值＞45.0，或无Ct值。
5.1.2 阳性对照： Ct值应＜28.0，且出现明显的S型扩增曲线。
5.2 结果判定
5.2.1 阳性：样品检测结果Ct值≤40.0，而且出现明显的S型扩增曲线，表明样品中检出牛结节性皮肤病病毒核酸。
5.2.2 阴性：样品检测结果Ct值＞45.0或无特异性S型扩增曲线，表明样品未检出牛结节性皮肤病病毒核酸。
5.2.3 可疑：样品检测结果Ct值在：40.0~45.0范围，应对样本进行复检。如重复实验结果Ct值仍在40.0~45.0范围，有明显指数增长，则判定为阳性，否则为阴性。
【注意事项】
1 实验前请仔细阅读本试剂盒说明书，严格按操作步骤执行。
2 所有试剂应在规定的温度储存，详细信息见试剂标签。
3 为了避免交叉污染，请尽可能在无核酸酶的环境下操作，并将试验过程分区进行（试剂准备区、样本制备区、扩增区等）。
4 配制PCR反应体系时应尽量避免气泡产生，扩增前应检查反应管是否盖紧，以免反应液泄露污染仪器。
5 为保证实验结果准确，样品尽量保证新鲜采集，2~8℃运输，长途运输请使用干冰。
6 所有试剂应避免反复冻融。
【储存条件及有效期】
试剂盒于-20℃保存，有效期为12个月。
【产品性能指标】
试剂盒采用的引物及探针与正在送审的国家标准采用的引物及探针一致。试剂盒检测临床样本的最低敏感性为2拷贝/μL。
【规格】 50头份/盒
【生产企业】 重庆澳龙生物制品有限公司
【地 址】 重庆市荣昌区板桥工业园区四支路五号
【邮 编】 402460
【技术服务】 023-46763511
【销售热线】 023-46761801
其它产品
我要咨询
在浏览我们产品的过程中，有任何让您感到特别满意或有待提升的地方吗？您的咨询或建议将直接帮助我们提升产品及服务质量，为您带来更加贴心的体验。
* 请填写上述字段（有*号字段为必填），我们将尽快回复您的反馈。
感谢您访问重庆澳龙生物官方网站，如您有合作意向或建议，请通过以下方式联系我们，我们会及时给您反馈，谢谢！
营销中心：023-46761801
技术服务：023-46763511
人力资源：023-46763267
国际贸易：023-46763211
公司地址：重庆市荣昌区国家高新技术产业园区（四支路5号）
