创新研发
Innovative R & D
详细信息
【兽药名称】
通用名:羊棘球蚴(包虫)EG95蛋白ELISA抗体检测试剂盒
商品名:无
英文名:ELISA Kit for Detection of Goat and Sheep Antibody against EG95 Protein of Echinococcus (Hydatid)
汉语拼音:Yang Jiqiuyou (Baochong) EG95 Danbai ELISA Kangti Jiance Shijihe
【主要成分与含量】
(1) | 抗原包被板 | 96孔/板x2板/盒 |
(2) | 阴性对照血清 | 50uL/管x1管/盒 |
(3) | 阳性对照血清 | 50uL/管x1管/盒 |
(4) | 酶标二抗 | 0.2mL/管x2管/盒 |
(5) | 稀释液 | 30mL/瓶x2瓶/盒 |
(6) | 10x浓缩洗涤液 | 30mL/瓶x1瓶/盒 |
(7) | TMB底物A液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
(8) | TMB底物B液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
(9) | 终止液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
(10) | 血清稀释板 | 96孔/板x2板/盒 |
(11) | 封板膜 | 2张/盒 |
(12) | 说明书 | 1份/盒 |
【性状】
试剂盒应密封完好、无破损、无裂痕、无渗漏。抗原包被板、阳性对照血清、阴性对照血清、酶标二抗、稀释液、10x浓缩洗涤液、TMB底物A液、TMB底物B液、终止液等组分齐全。
【作用与用途】
用于检测绵羊、山羊血清中细粒棘球蚴(包虫)主要保护性抗原EG95蛋白的抗体。
【用法与判定】
1 用法
1.1 样品制备 取动物全血,待血液凝固后,4000r/min离心10分钟,收集上清备用;也可采集血液,待凝固后自然析出血清,吸出血清备用。要求血清清亮,无溶血。
1.2 洗涤液配制 10x浓缩洗涤液恢复至室温后充分摇匀,用去离子水作10倍稀释备用。
1.3 样品与对照品稀释 在血清稀释板上,将待检血清和阴、阳性对照血清按1:50倍的体积稀释(推荐稀释方法:98uL样品稀释液中加2uL血清样品)。
1.4 操作步骤
1.4.1 加样 取抗原包被板,每孔加入50u稀释液,再取稀释好的待检血清和对照血清各50uL加入相应孔中,其中,阴性、阳性对照血清各2孔,轻轻振摇混匀孔中样品(勿溢出)。
1.4.2 温育 置37°C温箱内30分钟。
1.4.3 洗涤弃去反应液,每孔加入稀释好的洗涤液200uL,室温静置浸泡1分钟,用掉洗涤液,在吸水纸上拍干,重复3次:或者自动洗板机洗涤3次。
1.4.4 加酶标二抗 用稀释液将酶标二抗进行1:100稀释(现配现用),每孔加入稀释好的酶标二抗100uL。
1.4.5 温育 置37°C温箱内30分钟。
1.4.6 洗涤 同1.4.3。
1.4.7 显色 每孔加入100uL底物工作液(TMB底物A液与B液等体积混合好,现配现用),室温避光显色反应10分钟。
1.4.8 终止每孔加终止液50uL,10分钟内测定结果
1.4.9 读数 在酶标仪内读取各孔450nm波长吸光度。
2 判定
2.1 试验成立条件阳性对照孔OD:值均>1.20,阴性对照孔ODsom值均<0. 20。
2.2 结果判定 待检血清孔OD值<0.30,判为棘球蚴(包虫)EG95抗体阴性;待检血清孔OD:som值≥0.30,判为棘球蚴(包虫)EG95抗体阳性。
【注意事项】
(1)除酶标二抗外,各种试剂都应于使用前平衡至室温后方可使用,有结晶析出的,务必37℃水浴加热使其完全溶解;液体试剂用前混匀。为保证结果准确可靠,操作环境温度应控制在20土5℃。
(2)微量移液器应进行定期校准,以避免误差过大影响检测结果。
(3)应确保血清样本的质量,避免使用严重溶血样品和脂状样品;避免清样本反复冻融;血清样本2~8℃储存应不超过5天,长期保存应置-20℃以下:如血清样本出现浑浊或絮状物,应离心后取上清进行检测。
(4)防止试剂和样本的相互污染;试剂盒应在有效期内使用,避免不同批次的试剂盒混用。
(5)没有用完的抗原包被板条应与干燥剂一同放回密封袋中,于2~8℃保存。
(6)温育时,反应板不能看放,应平铺在37℃温箱中,以免导致各反应板受热不均。
(7)TMB底物A液和B液不要暴露于强光,避免接触氧化剂。
(8)终止液具有腐蚀作用,避免接触眼睛和皮肤。
(9)严格按说明书操作,并控制好每一步的反应时间和温度。
(10)本试剂盒不能区分细粒棘球蚴自然感染与疫苗免疫接种产生的抗体:本试剂盒检测多头蚴感染的羊血清时,出现7.69%(1/13)阳性率,因此,不排除其与羊多头蚴抗体发生交叉反应的可能性。
【规格】192孔/盒
【贮藏与有效期】2~8℃保存,有效期为9个月。
【批准文号】兽药生字230248948
【生产企业】重庆澳龙生物制品有限公司
【地 址】重庆市荣昌区板桥工业园区四支路五号
【邮 编】402460
【技术服务】023-46763511
【销售热线】023-46761801
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